離心機的溫度在司法中的重要作用
離心機的溫度在司法中的重要作用 | 時間: August-12 18:44:58 | 分類:技術欄目
凌儀生物提供高速離心機,美國Bio-rad伯樂電泳,德國eppendorf艾本德移液器,美國ABI基因擴增儀PCR,雅培原位雜交儀,Thermo熱電離心機等實驗室儀器設備,以及Corning康寧,Axygen愛思進,Greiner格瑞拉等耗材要省錢,別錯過哦。在司法鑒定、分子生物學、生物制藥等領域,離心機幾乎是實驗室中出鏡率較高的儀器了,而離心溫度控制一直是較關鍵卻容易被忽視的一點。今天就讓小編帶你走近離心機的世界一探究竟吧!
相信看過美劇《CSI》(犯罪現場調查)的朋友們一定對劇中諸如指紋數據庫、從帶血棉簽中五分鐘內驗出DNA等等炫酷的證據檢測橋段并不陌生,雖然是源于想象的虛構,但卻自然而逼真。其實,縱觀司法科學鑒定技術的發(fā)展長河,《CSI》里面的許多高科技手法在現實中已被廣泛應用,特別是DNA技術的應用無疑是個歷史性的突破。
從犯罪現場到實驗室的王牌證據
長期以來,作為給犯罪嫌疑人定罪的“毋庸置疑的鐵證”,DNA鑒定一直被認為是目前法庭科學領域中較有效的統一認定技術,雖然說對于少數特殊情況存在一定的例外和局限性,但總的來說,DNA證據仍是當今人類世界可靠性較高的證據。尤其是在血腥的犯罪現場留有血跡、精斑、毛發(fā)等人體生物檢材的命案中,DNA證據一直是對付罪犯的利器,被社會各界寄予厚望。
眾所周知,得到足量且純凈的DNA樣本是進行準確鑒定的前提,因此DNA提取純化技術是法醫(yī)DNA檢驗的第一個步驟,也是較關鍵的步驟。通常,從犯罪現場提取到的各種生物檢材難免會腐敗、變質和被污染,這就對DNA提取純化技術有了更高的要求。目前在法醫(yī)實驗室中,常用的提取方法無外乎五種,即Chelex100法、有機法(苯酚-氯仿提取)、磁珠法、鹽析法、堿性法(NaOH提?。2还苣姆N方法,提取過程大體上分為材料準備、破碎細胞或包膜以釋放內容物、核酸分離純化、沉淀或吸附核酸并去除雜質、將核酸溶解在適量緩沖液或水中。而作為整個過程當中至關重要的環(huán)節(jié),離心分離的好壞直接決定著實驗的成敗。
不容忽視的離心內部環(huán)境——溫度控制
說到DNA提取等生物樣品分離實驗,除了在司法鑒定中扮演著舉足輕重的角色以外,在基因工程和蛋白質工程等分子生物學領域也應用極廣,而樣品分離實驗自然離不開離心機的性能技術指標與正確使用,比如轉速設定、離心時間、擺放位置等,而其中較關鍵也是容易被忽視的一點就是樣品的溫度控制。下面我們拿DNA提取實驗舉例,采用傳統且應用較廣泛的有機法在不同溫度條件下提取血液DNA。
在細胞的細胞核中,DNA與蛋白質結合形成染色體,因此提取DNA時既要將蛋白質等物質除盡,又要盡可能保持DNA分子的完整性,即保持DNA帶不發(fā)生斷裂,無外源核酸污染。實驗在
看過了上面的實驗,您是不是對溫度控制的重要性有了直觀的認識呢?其實,對于諸如生物制藥或營養(yǎng)物質萃取等對生物活性保留要求很苛刻的技術項目,離心萃取的溫度都需要嚴格符合要求,與標準相差幾攝氏度可能就會嚴重影響品質,常見的情況就是超過溫度區(qū)間范圍會對活性酶的指標有影響或者溫度過低導致凝結,因此選用帶精確溫控的離心機則是重中之重。
需要嚴格溫控的實驗基本上都要求樣品保持在較低的溫度,因此在使用帶冷凍功能的離心機之前需要進行預冷,并進行溫度校準和監(jiān)測溫度波動。現在問題來了,市面上離心機的溫度傳感器通常都在機腔內,而中間會隔著不同大小規(guī)格的離心管,不同型號的轉子以及腔內空氣等介質,所以即使準備工作做得很周全,在離心機高速運轉的時候,傳感器所探測到的腔體溫度與樣品的實際溫度難免會有差值,這個差值又因為轉子選擇,溫度、轉速設置的不同而發(fā)生進一步的變化。如前所述,這個差值在那些要求極為苛刻的實驗項目中是絕不允許的。